CENTRIFUGAÇÃO: IMPACTO NAS ANÁLISES

A centrífugação é amplamente utilizada em laboratórios clínicos para a separação de componentes e preparo de amostras para análises. Em análises bioquímicas e imunológicas, é rotineiramente usada para separar células sanguíneas do plasma/soro, além de ser usada para concentração dos elementos urinários para a análise microscópica da urina e até em processos de extração de DNA.

Como os Elementos São Separados

O equipamento usa a força centrífuga para acelerar o processo de sedimentação, devido ao movimento de rotação, as partículas e células mais densas são empurradas para o fundo do tubo, ou seja, para o ponto mais externo em relação ao eixo de rotação.

Ao trabalhar com centrífugas, você encontrará duas unidades de medida diferentes chamadas Força Centrífuga Relativa (FCR) e número de rotações por minuto (RPM).

A força necessária para que um pedaço de material seja movido varia de acordo com a dimensão da partícula. Partículas grandes (por exemplo, células) precisam de menos força do que partículas menores (por exemplo, proteínas).

A Força Centrífuga Relativa e o Número de Rotações por Minuto

A Força Centrífuga Relativa (RCF) é uma medida da força à qual a amostra está exposta. A força é derivada da rotação do motor e do raio da centrífuga, logo a RCF é um método de medição que sempre será o mesmo, independentemente de você usar uma centrífuga alternativa com um tamanho diferente.

RPM é uma medida de quão rápido o motor gira e embora esta informação possa ser útil, ela não tem a capacidade de determinar a quantidade de força G à qual a amostra está exposta. Uma centrífuga operando a 5.000 RPM, por exemplo, estaria girando a 5.000 RPM, independentemente do tipo de centrífuga empregada e das dimensões do rotor giratório. O RCF incorpora o tamanho do rotor em sua medição para garantir que possamos calcular a força gravitacional que está sendo aplicada.

Vale lembrar que a centrifugação correta das amostras segue padrões de valores de RCF e não RPM, exatamente para garantir que toda amostra esteja sempre nas mesmas condições.

Cuidados Para uma Boa Centrifugação

Realizar a manutenção e limpeza preventiva do equipamento
Usar cubetas adequadas ao tamanho dos tubos a serem centrifugados
SEMPRE balancear os tubos para minimizar o risco de quebra, de acordo com o mesmo peso
Aguardar até a completa centrifugação, ou seja, nunca parar a centrífuga com as mãos ou de forma brusca, pois além de ocasionar possíveis hemólises pode descolar o gel separador.

Erros na Centrifugação

Existe alguns erros durante a centrifugação que podem interferir na posterior análise, a hemólise é uma das principais consequências de uma incorreta centrifugação, aumentando falsamente os valores de alguns analitos como potássio e desidrogenase láctica, além de complicar as análises que utilizam a Colorimetria e a espectrofotometria, entre os principais erros temos:

Centrifugação incompleta
Centrifugação excessiva
RPM muito alto ou tempo muito longo
Desbalanceamento das amostras

Conclusão

A centrífuga é um equipamento indispensável no laboratório de análises clínicas, seu papel é fundamental nos processos pré-analíticos e, por isso, cuidados devem ser tomados para que o uso da centrífuga auxilie e não prejudique uma boa análise das amostras.

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Referências

Beckman Coulter Life sciences – Campo centrífugo relativo. Disponível em: https://www.mybeckman.in/resources/technologies/centrifugation/principles/relative-centrifugal-field

Informativo Digital. Nº 5. maio/2015 – CENTRIFUGAÇÃO DE AMOSTRAS Disponível em: https://www.labrede.com.br/portal/files/labinforma-tecnico-centrifugacao.pdf