Provas bioquímicas: Identificando microrganismos
As provas bioquímicas auxiliam na identificação de microrganismos em microbiologia clínica. Essas técnicas utilizam reações químicas específicas para distinguir entre diferentes espécies bacterianas e determinar suas características metabólicas. Neste artigo, exploraremos as provas bioquímicas mais comuns na identificação de microrganismos e como essas ferramentas são amplamente utilizadas em laboratórios clínicos.
Princípios das Provas Bioquímicas:
As provas bioquímicas se baseiam nos princípios de que diferentes microrganismos têm diferentes vias metabólicas e, portanto, reagem de maneira distinta a determinados substratos e reagentes químicos. Ao medir as respostas desses microrganismos a várias substâncias, é possível identificá-los com base no conjunto de suas características bioquímicas.
Provas bioquímicas mais comuns:
Prova da catalase: Usada para diferenciar estreptococos de estafilococos. Para realizar essa prova é necessário colocar a amostra da bactéria em contato com o peróxido de hidrogênio (H2O2). As bactérias que são catalase positiva levam à formação de bolhas de oxigênio (O2).
Prova da oxidase: Detecta a presença da enzima oxidase no citocromo C, uma proteína presente nas bactérias que é capaz de realizar oxidação e redução.
Prova da coagulase: Detecta a presença ou não de coagulase na bactéria. Nesse teste é utilizado plasma de coelho que, quando entra em contato com a bactéria que possui a enzima coagulase (que converte fibrinogênio em fibrina), vai coagular.
Vermelho de metila: Avalia a capacidade das bactérias de produzir ácidos a partir da fermentação da glicose. Se a bactéria for fermentadora de glicose, o pH do meio vai diminuir, tornando o meio avermelhado. Se a bactéria não for fermentadora de glicose, o pH do meio vai subir, tornando o meio amarelo.
Indol: Identifica se a bactéria é capaz de produzir indol a partir do triptofano. O meio de cultura, onde a bactéria vai ser inoculada, é enriquecido com triptofano. Se a bactéria tiver uma enzima chamada triptofanase, ela vai conseguir quebrar o triptofano em indol. Em caso de reação positiva, quando adicionarmos o reativo de Erlich, ele vai reagir com o indol, levando à formação de um anel rosa/vermelho no meio de cultura.
Prova de Urease: Identifica microrganismos que produzem a enzima urease, que quebra a ureia em amônia. Bactérias como Helicobacter pylori são positivas para esta prova.
Fermentação de carboidratos: Os microrganismos são capazes de fermentar os carboidratos gerando diferentes produtos, ou seja, cada microrganismo vai reagir de uma maneira diferente com os carboidratos, podendo levar à geração de gases ou até mesmo de ácidos orgânicos.
Prova de Citrato: Avalia a capacidade da bactéria de utilizar o citrato como única fonte de carbono. Bactérias que podem fazer isso, como Escherichia coli, crescerão e alcalinizarão o meio.
Importância na Microbiologia Clínica:
As provas bioquímicas são importantes na microbiologia clínica por várias razões:
- Identificação Precisa: Permitem a identificação precisa do microrganismo causador da infecção, o que é crucial para escolher o tratamento antimicrobiano adequado.
- Acompanhamento de Resistência: Algumas provas bioquímicas também podem indicar a resistência a certos antibióticos, orientando a terapia antimicrobiana.
- Epidemiologia: Contribuem para estudos epidemiológicos, permitindo o rastreamento de surtos de infecções e a identificação de cepas bacterianas específicas.
As provas bioquímicas desempenham um papel importante na identificação e caracterização de microrganismos em microbiologia clínica. Essas ferramentas permitem aos analistas clínicos determinar com precisão os agentes causadores de infecções, guiar o tratamento e contribuir para a vigilância epidemiológica. São uma ferramenta do arsenal de diagnóstico utilizada em laboratórios clínicos em todo o mundo.
Leia sobre os métodos de coloração em microbiologia aqui
Referências
GEMELLI, Tanise. Manual prático de Microbiologia clínica. Unisinos, 2020.
SANTOS, Eduarda Pastana dos; ARTHUR, Mayara Nerina Fortes; RIBEIRO, Karla Tereza Silva. Guia Prático – Provas de Identificação de Enterobactérias. Universidade Federal do Pará, 2021.
Vieira, Darlene Ana de Paula V658m Microbiologia Geral / Darlene Ana de Paula Veira, Nayara Cláudia de Assunção Queiroz. – – Inhumas: IFG; Santa Maria: Universidade Federal de Santa Maria, 2012.
